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课件网) 第2章 细胞工程 第2节 动物细胞工程 Part1 动物细胞培养 1、动物细胞培养（基础）2、动物细胞融合与单克隆抗体3、动物细胞核移植技术与克隆动物动物细胞工程的基本技术发酵工程 目录 /CONTENTS 01 02 动物细胞培养的条件 微生物的纯培养 03 干细胞培养及其应用 动物细胞培养的过程 皮肤的自体移植 灰绿色 小面积烧伤：植皮(自身)后恢复 1）使用他人皮肤？ 患者自身的不够用，如何解决？ 大面积烧伤？ 2）培养自身细胞？ 从社会中来 人造皮肤：人体再生术的秘密 1、概念： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 2、目的： 获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。 3、原理： 细胞增殖（有丝分裂） 那么，动物细胞的培养需要哪些条件呢？ 动物细胞培养 动物体 组织 单个细胞 细胞生长和增殖 取出 分散 适宜条件 01动物细胞培养的条件糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境充足的营养、稳定的内环境将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。培养基的构成：合成培养基+血清等天然成分一般用液体培养基，也称为培养液01动物细胞培养的条件糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境①培养液、培养用具：灭菌处理；②无菌操作；③适量添加抗生素定期更换培养液，以便清除代谢物。①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以_____为宜；②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为_____；③适宜的渗透压：维持细胞正常的形态和功能。36.5±0.5℃7.2-7.401动物细胞培养的条件糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境维持培养液的pH95%空气+5%CO2的CO2培养箱O2：细胞代谢所必需CO2培养箱松盖培养瓶培养皿02动物细胞培养的过程1）选幼龄动物（或胚胎）的组织器官这些个体的细胞分化程度低、分裂能力强，易培养。3）分散细胞时为何不选用胃蛋白酶？2）培养前为什么分散成单个细胞？①分散不会限制彼此的生长与增殖；②分散有利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，而胃蛋白酶的适宜pH约为2，在此环境中会失活。02动物细胞培养的过程体外培养的动物细胞要求：（培养瓶（皿）内表面光滑、无毒、易于贴附）悬液中分散的细胞贴附在瓶壁生长的现象；细胞贴壁当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象接触抑制细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等接触抑制悬浮生长贴壁生长(大多数）02动物细胞培养的过程①原代培养：指动物组织经处理后的初次培养,分瓶前的细胞培养。②传代培养：分瓶后的细胞培养。悬浮细胞贴壁细胞②制成细胞悬液，分瓶培养①收集细胞加培养液离心法胰蛋白酶，离心法思考●讨论2：植物组织培养和动物细胞培养的比较 P42 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基 培养基特有成分 过程 结果 相同点 固体培养基 葡萄糖、动物血清 液体培养基 细胞增殖 植物细胞的全能性 许多细胞 蔗糖、植物激素 ①都进行有丝分裂，不涉及减数分裂； ②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件 新的植株 外植体 ↓脱分化 愈伤组织 ↓再分化 芽、根或胚状体 ↓生长发育 植物体 动物的组织 ↓ 机械法或胰蛋白酶、 ↓ 胶原蛋白酶处理 细胞悬液 ↓ 原代培养 ↓ 细胞悬液 ↓ 传代培养 03干细胞培养及其应用1.干细胞的概念：2.干细胞的来源：3.干细胞的类型：动物和 ... ...
