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课件网) 第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数 生 物 2026 内容索引 自主预习 新知导学 合作探究 释疑解惑 课堂小结 自主预习 新知导学 一、选择培养基 1.筛选微生物的原理:人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。 2.选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。 二、微生物的选择培养 1.目的菌:土壤中能分解尿素的细菌。 2.接种方法:稀释涂布平板法。 3.操作步骤 将10 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀 ↓ 取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中,依次等比稀释至107倍 ↓ 取0.1 mL菌液,滴加到培养基表面 ↓ 将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中 ↓ 将涂布器放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后,再进行涂布 ↓ 用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀 ↓ 待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置,放入30~37 ℃的恒温培养箱中培养1~2 d。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落 三、微生物的数量测定 1.测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和利用显微镜进行直接计数。 2.用稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目 (1)原理 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (2)注意事项 ①为了保证结果准确,一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。 ②同一稀释度下应至少对 3 个平板进行重复计数,然后求出平均值。 ③统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。 四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1.探究目的 (1)从土壤中分离出能分解尿素的细菌。 (2)计算每克土壤样品中能分解尿素的细菌的数目。 2.基础知识:只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 3实验设计 【预习检测】 1.判断正误。 (1)利用选择培养基可以将目的菌株筛选出来。( ) (2)在培养基中加入青霉素,则该培养基允许酵母菌、霉菌生长,阻止一般的细菌生长,故为选择培养基。( ) (3)当样品稀释度足够高时,一般平板上一个菌落来源于一个活菌。( ) (4)统计结果一般用活菌数来表示。( ) (5)利用稀释涂布平板法统计的菌落数目一般远远多于活菌的实际数目。 ( ) √ √ √ × × (6)常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法。( ) (7)显微镜直接计数法也适用于统计活菌数目。( ) (8)判断培养基中是否有杂菌污染,需将空白培养基和接种的培养基同时进行培养,再进行对照。( ) √ × √ 2.某生物科技小组的同学从土壤中分离得到了能够分解尿素的微生物。下列有关叙述错误的是( ) A.本实验用到选择培养基,且以尿素为唯一氮源 B.分解尿素的微生物会产生脲酶 C.涂布平板时,应用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面;涂布时可转动培养皿,使涂布均匀 D.应只选择平板中较大的菌落进行计数 答案:D 3.下列有关用平板划线法和稀释涂布平板法纯化培养大肠杆菌的叙述,正确的是( ) A.都需要用液体培养基 B.都需要使用接种环进行接种 C.都需要在酒精灯火焰附近进行接种 D.都可以用菌落数来测定活菌数 答案:C 解析:平板划线法和稀释涂布平板法纯化培养大肠杆菌都需要用固体培养基,都需要在酒精灯火焰附近进行接种,以防止杂菌污染。平板划线法需要使用接种环进行接种,只能分离微生物,不能测定活菌数;稀释涂布平板法需要用涂布器接种,可根据菌落数来测定活菌数。 4.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106 ... ...
